二氧化氯消毒剂是一种高效、安全、环保的消毒剂,具有杀菌能力强,在水中很少形成氯代有机物,应用于消毒领域,特别在水体消毒中应用前景广阔,如生活饮用水、游泳池水、医院污水等水体消毒处理。二氧化氯消毒剂在较高浓度下杀菌效果良好,对低浓度和长时间作用效果的研究相对较少。
1.实验用消毒剂为一元包二氧化氯稳定性溶液,使用时不需活化,其原液二氧化氯浓度为500 mg/L (国内产品)。实验指标菌为大肠杆菌(8099) 为本实验室保存菌种; 相关培养基试剂包括胰蛋白胨大豆琼脂培养基(TSA); 胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS); 含1 000 mg/L吐温的胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS); 中和剂为含 1 000 mg/L硫代硫酸钠的磷酸盐缓冲液 (PBS), 中和剂经鉴定实验证明有效(实验操作省略)。上述产品均为国内市售品。
2.取大肠杆菌营养琼脂培养基斜面培养24h新鲜培养物,用TPS或纯水洗下斜面培养物,混匀稀释配制成实验所需浓度的菌悬液,备用。
3.用纯水稀释配制所需浓度的二氧化氯消毒液,实验在21~23℃条件下进行。向外mL 离心管中加入49mL 设定浓度的消毒剂,再加入适宜稀释度的菌悬液 1mL,混匀计时。作用30min后,吸取1mL混合溶液到1mL中和剂试管中,混匀后,将2mLl 合液接种到平皿中,倒入培养基,摇匀后培养 48h观察结果。然后把剩余的菌药混合的离心管加盖密封,存放实验温度下每间隔24h取样液接种培养进行活菌计数,直到5d。
本实验考虑到试验观察长达5d,消毒剂本身有消耗和分解,所以设计采用了可密闭的离心管作为实验容器,作用试剂容量增加到50mL,以减少因消毒剂浓度降低产生的影响。考虑到常规使用的30g/L小牛血清白蛋(BSA)对低浓度二氧化氯消毒剂杀菌效果的影响较明显,所以用含1 000 mg/L胰蛋白胨的胰蛋白胨生理盐水溶液(TPS) 作为有机物来观察对杀菌效果的影响。通过实验也证明,溶液中含有低浓度的有机物,对低浓度二氧化氯消毒剂对大肠杆菌的杀菌效果有较明显的影响。